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本文地址:http://www.kcntq.com/Immune-coprecipitation-testing-services.htm
文章摘要: 免疫共沉淀检测服务,市道之交心甘情原西化,日新月著宏扬烟飞星散。

免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)技术是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的,用于研究蛋白质相互作用的基本方法。原理是以细胞内源性靶蛋白为诱饵,将靶蛋白抗体与细胞总蛋白进行共孵育,促进免疫复合物的形成。随后加入能够与靶蛋白抗体结合的protein A/G,形成“结合蛋白-靶蛋白-靶蛋白抗体”复合物。免疫复合物经纯化后进行凝胶电泳分离,结合Western blot 或质谱技术,进而达到纯化目的蛋白质、定性检测抗原或抗体的目的。与其它研究方法相比,免疫共沉淀在生理条件下检测蛋白质之间的相互作用,因此,不仅可以检测到体内形成的天然复合体,而且可排除过表达靶蛋白所带来的假阳性。其次内源性的靶蛋白质是完全加工、修饰和成熟的蛋白质,因此,依赖于修饰的蛋白质相互作用也能被检测到。

免疫共沉淀原理图
免疫共沉淀原理图
服务内容
?  标签蛋白的免疫共沉淀 (Myc-tag, Flag-tag, HA-tag)
?  非标签蛋白的免疫共沉淀 (Native protein)
?  染色质免疫共沉淀(Chip-IP)
技术流程
?  构建相关真核表达载体,转染细胞并获得表达;
?  蛋白质抽提与定量;
?  免疫沉淀(以normal IgG作为对照);
?  免疫沉淀产物SDS-PAGE和western blot分析;
?  完整技术服务实验报告提交。
客户需准备的材料
?  组织、细胞、蛋白质溶液等样品,待测蛋白的相关信息等;
?  如需构建基因的过表达载体,则还需提供过表达载体及其相关信息;
?  其他与免疫沉淀相关信息。
实验报告内容
?  免疫沉淀产物,电子图片及分析结果;
?  蛋白质鉴定结果,SDS-PAGE及western blot分析结果;
?  完整的实验步骤、使用仪器等。

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